Operar Equipo y Materiales de Lab.

Nombre: Christian Camacho Jaramillo

Grupo: 2 LM

 

Practica 7

OBSERVACION MICROSCOPICA

Una vez teñida la laminilla con el frotis se le aplica una gota de aceite de inmersión para poder observar el objetivo de 100x en este proceso de observación microscópica tenemos la facilidad de poder observar formas esféricas y bacilos lo que nos da como resultado observar las coloraciones que se presentan en la tinción de gram. La presentación en esféricas nos indica que estamos observando bacterias denominadas cocos donde debemos investigar sus características coloniales nombres de importancias técnicas. Cuando observamos bastoncitos estamos tratando de identificar bacilos donde encontraremos una gran variedad de ellos de forma estructural.

Operar Equipo y Materiales de Lab.

Nombre: Christian Camacho Jaramillo

Geupo: 2 LM

Practica 6
TINCION DE GRAM.

Se debe realizar una tinción de gran en el frotis preparado anteriormente para poder llegar a la observación microscópica de los microorganismos denominados bacterias los observamos en forma de esfera, bastones y espirales cabe mencionar que en este elemento de observación no podríamos llegar a señalar microscópicamente las espirales.

Materiales:
Tinción de gran
Caja de copli.
Portaobjetos con frotis.
Algodón seco.
Papel secante
Mecheros
Aceite de imersion
Microscopio.


Desarrollo:
Realizamos el proceso de tinción utilizando la tinción de gram que anteriormente ya investigamos para aplicar la técnica correspondiente de la tinción. La que se basa en tiempo una vez tenida la lamina de cristal verificamos que no se queme con tintura por lo que no sirve el frotis y como resultado debemos elaborar un nuevo frotis. Y la laminilla en su termino esta bien teñida acudimos a aplicarle una gota de aceite de inmersión la montamos en la platina del microscopio, aseguremos con las pinzas de platina una ves estando asegurada realizamos el enfoque en 100x para nuestra observación microscópica de resultado de poder visualizar las bacterias de forma esférica y bastón ambas se pueden encontrara en una sola pieza 2,3, y 4 piezas en cadenas largas y agrupadas hasta el tercer plano estas esferas se les denomina cocos. Así mismo los bastones.


La tinción de Gram o coloración Gram es un tipo de tinción diferencial empleado en microbiología para la visualización de bacterias, sobre todo en muestras clínicas. Debe su nombre al bacteriólogo danés Christian Gram, que desarrolló la técnica en 1884. Se utiliza tanto para poder referirse a la morfología celular bacteriana como para poder realizar una primera aproximación a la diferenciación bacteriana, considerándose Bacteria Gram positiva a las bacterias que se visualizan de color violeta y Bacteria Gram negativa a las que se visualizan de color rosa.


Bacterias:
Coco, tipo morfológico de bacteria. Tiene forma más o menos esférica (ninguna de sus dimensiones predomina claramente sobre las otras).
Diplococo: estos cocos se dividen en un sólo plano formando parejas, y dan la impresión de un grano de café, entre éstos podemos citar a los meningococos y gonococos.
Algunos ocasionan enfermedades a los humanos, también es causante de enfermedades como el de la meningitis, otros resultan inocuos o incluso beneficiosos.

Operar Equipo y Materiales de Lab.

Nombre: Christian Camacho Jaramillo

Grupo: 2 LM

                                                                       Practica 5

    FROTIS

El alumno debe realizar un frotis con el producto obtenido en las cajas petri el cual debe ser fino y delgado para poder realizar un proceso de punción.

Materiales:
1. Cajas petri con medio de cultivo.
2. Aza bacteriológica.
3. Vaso de precipitado con agua destilada 25ml.
4. Mecheros de bunsen.
5. Papel secante.

Desarrollo:
Se toma un porta objetos limpio para poder realizar en su superficie un frotis fresco con el material de la caja petri “bacteriológico”. Con el aza se va realizar un barrido en el portaobjetos en su parte central, esterilizando primero el aza bacteriológica en la flama del mechero dejándolo hasta el rojo vivo, se retira se introduce en el bazo de precipitado se toma una gota de agua con el aza se introduce a la caja petri sobre las colonias desarrolladas se toma una pequeña muestra del producto que se desarrollo y se deposita en el portaobjetos dándole pequeños movimientos de izquierda a derecha para extender el producto obtenido si el frotis se encuentra grueso se vuelve a esterilizar el aza bacteriológica se vuelve a tomar una gota de agua se deposita en el portaobjetos y se realiza la misma maniobra y así sucesivamente hasta que finamente delgado. Una ves terminado el proceso de barrido realizamos una maniobra sobre la flama del mechero con el mismos sin dejarlo fijamente en la flama a esto le denominamos fijación de frotis por calor seco a fuego directo. Una vez fijado el frotis queda listo para l proceso de tinción de gramo

Operar Equipo y Materiales de Lab.

Nombre: Christian Camacho Jaramillo

Grupo: 2LM

  

Practica 4
OBSERVACION MACROSCOPICA

Materiales:
1. Vaso de precipitado con 25ml. De agua destilada.
2. Pie de rey o vernier.
3. Torundas de algodón secas.
4. Torundas de algodón alcoholizadas.



Desarrollo:
Las cajas petri ya sembradas son depositadas en el campo esterilizado que se realiza con los dos mecheros o sea en la parte media. Una vez teniendo el campo de esterilización se observan los crecimientos de las cajas petri se registra lo observado, se abre a caja petri se registra el olor que despide, el color que presenta y se registra en gráficos dibujos y fotográficas.

Operar Equipo y Materiales de Lab.

Nombre: Christian Camacho Jaramillo

Grupo: 2 LM

Practica 3
Siembras de caja petri en forma de estrías

Materiales:

1. Cajas petri con medio de cultivo ya elaborado.

2. Muestras de desechos como saliva, muestras interdentales.

3. Raspado de piel.

4. Orina.

5. Agua de verduras.

6. Agua fresca.

7. Muestra de sangre.

8. Aza bacteriológica.

9. 2 mecheros.

10. Vaso precipitado con 5ml. De agua destilada.

11. Papela para cubrir mesa.

12. Papel secante.

13. Torundas de algodón.

14. Masquen tape.

Desarrollo:

Se realiza la toma de una muestra de desecho para sembrarla en forma de estría en caja petri de la siguiente manera .con la aza bacteriológica tomamos una pequeña muestra de desecho y sembramos en forma de estría en la caja petri. Realizando la venopunsion del pliegue del brazo con la jeringa presentada en forma acostada. La jeringa tiene una aguja con punta cortante lo que nos da la facilidad de que esta pueda entrar al conducto sanguíneo. La jeringa se toma para verificarla y asegurarla del embolo jalándolo hacia a fuera e introduciéndolo hacia el fondo para que no exista aire en ella a así mismo aseguremos el embolo. Con mucha suavidad jalaremos el embolo para poder extraer el liquido sanguíneo (tejido conectivo) ya teniendo la muestra de sangre en la jeringa la trasladamos e introducimos en el tapón del tubo y se realiza automáticamente el baseado de la sangre en el tubo el cual no contiene anticoagulante. Una ves tomada la sangre se le da el tiempo necesario (reloj en mano) para verificar el tiempo de coagulación para que el aluminio anote de una a 8 minutos tiempos normales pero va a coagular de 1 a 2. Los tubos que contiene la sangre de van centrifugar a 1500 por minuto donde va a ver un proceso de separación por precipitación de centrifugado durante 5 minutos encontrándonos con separación de paquete sanguíneo y plasma. Se separan utilizando el tubo de ensayo vacio plasma-sangre, se deshecha el paquete sanguíneo utilizando la norma 087 y el plasma se utiliza para realizar la siembra.

Nota:

Toda esta técnica también se llevara a cabo en la practica 8 de pruebas de aglutinación.

La aza bacteriológica se pasa por la flama del mechero para esterilizarla y volver a hacer el mismo proceso para analizarla con otra muestra de desecho. Una vez sembradas las cajas petri se sierran se etiquetan aplicando los datos de la muestra y el tipo de estría, el nombre de la estría sembrada. Es importante realizar la siembre en caja petri con varilla de cristal a la cual le damos el nombre de por dispersión. Una ves etiquetadas las cajas se entregan al encargado o encargada para que se les de entrada la proceso de incubación en la estufa para incubación a 37 durante 24, 48,72 horas.

Nota:

En el proceso de siembra de líquido plasmático se requiere el siguiente material.

Tuvo con tapón rojo.

Jeringa de 5ml.

Torniquete de algodón con alcohol.

Centrifuga

Tubo de ensaye vacio.

Desarrollo:

Técnica de Venopunsion se realiza asepsia y antisepsia del pliegue del brazo para poder tener la zona limpia este proceso antiséptico se lleva a cabo de arriba hacia abajo una vez que se tiene la zona limpia se acude a la extracción de sangre fresca del pliegue del brazo.

Operar Equipo y Materiales de Lab.

Nombre: Christian Camacho Jaramillo

Grupo: 2 LM

 

Practica 2
Técnicas de esterilización

Investigar técnica de esterilización por calor húmedo en auto clave. Se hace hincapié que los alumnos deben de conocer adecuadamente este tipo de técnica ya que al realizarla tiene mucho riesgo que puede ocasionar un accidente. Se debe de tener lista desde el principio de la práctica para ahogar y agilizar tiempo. Debemos tener lista higiénicamente con su agua destilada hasta el ras de la parrilla y seguir las indicaciones de la técnica de esterilización.

Calor Húmedo: El calor húmedo produce desnaturalización y coagulación de proteínas. Estos efectos se deben principalmente a dos razones:*El agua es una especie química muy reactiva y muchas estructuras biológicas son producidas por reacciones que eliminan agua.*El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho más elevado que el aire.

Operar Equipo y Materiales de Lab.

Practica 1
MEDIOS DE CULTIVO

Objetivo.

Introducción.

Índice:

En esta práctica que se va a realizar se tomando en cuenta las tres etapas que se refieren a pre-analítica, analítica y port- analítica las cuales se deben compaginar con la practica secuencial.

Instrucciones:

El alumno del laboratorio de análisis clínico debe de estar a puntual con su equipo de bioseguridad en el laboratorio.

Solicitud vale de material para que se habiliten todos los materiales a utilizar en práctica de medio de cultivo.

Una vez están en el laboratorio de forma muy primordial los integrantes de las mesas de trabajo deberán de habilitar el equipo de esterilización “auto clave” el cual se debe cargar con agua destilada.

Vestir la mesa de laboratorio con papela blanco habilitar línea de gas LP cualquiera de los integrantes debe de abrir la válvula de la línea verificando que las válvulas de cada mesa estén abiertas las cuales se encuentran por debajo de las mismas.

Desarrollo de la práctica:

Para realizar un medio de cultivo requerimos de los siguientes materiales de cristalería y apoyo científicos.

Cristalería:

Matraz Elermeyer 250 ml.

Vaso de precipitado 250ml.

Vaso de precipitado 200 ml.

Varilla de cristal (como agitador)

Vidrio de reloj

Cajas petri 5 a 7.

Espátula

Balanza granataria

Cinta tape color café

Embudo de cristal

Torundas de algodón

Papel secante

Medio de cultivo 450gr.

Regla de tres

Agua destilada

Re hidratamos de acuerdo a las indicaciones que están presentes en las sindicaciones de medio de cultivo la cantidad necesaria de polvo reactivo para elaboración de 5 a 7 cajas petri en la que se debe de utilizar también agua destilada para poder re hidratar el polvo reactivo medio de cultivo necesitamos manejar una regla de tres lo cual nos dará el resultado en % pesamos el medio de cultivo en polvo que vayamos a necesitar en el vidrio de reloj. Una vez pesado se mescla con el agua solicitada 5 o 7 cajas petri para utilizaremos el matraz elerlmeyer para la mezcla en su caso dado el agitando con la varilla de cristal para que no queden grumos una vez terminando este proceso de agitación y mezcla dejamos reposar el tiempo que nos marque la etiqueta del medio de cultivo. En este espacio de tiempo todo el equipo consensa su nota de desarrollo la cual lleva gráficos, fotos, pequeños videos y así le damos tiempo al proceso de elaboración. Una ves reposado el producto se tiene ya listo los mecheros de bunsen para poder realizar el proceso de ebullición al cual se le daba un minuto de tiempo desde que este empieza a iniciar. Se realiza un pequeño por encima de la flama siendo muy cuidadosos en que el producto no se derrame del equipo donde se contiene ya que puede ocasionar quemaduras hasta de segundo grado. Se observa se retira cuidadosamente una y otra vez se toma el tiempo hasta que termine la acción se observa, registra se deposita en la mesa y se deja enfriar.

Ya estando frio el medio de cultivo listo taponeamos con algodón sellando con cinta masquintape etiquetamos con el numero de mesa con el nombre del medio de cultivo a demás la hora y fecha.